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高純氬色譜分析儀廠家分析色譜法的基本技術(shù)和方法
高純氬色譜分析儀廠家分析色譜法常見的方法有:柱色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。
分配色譜利用固定相與流動相之間對待分離組分溶解度的差異來實現(xiàn)分離。分配色譜的固定相一般為液相的溶劑,依靠圖布、鍵合、吸附等手段分布于色譜柱或者擔(dān)體表面。分配色譜過程本質(zhì)上是組分分子在固定想和流動相之間不斷達(dá)到溶解平衡的過程。
1. 薄層色譜法
薄層色譜法是應(yīng)用非常廣泛的色譜方法,這種色譜方法將固定相圖布在金屬或玻璃薄板上形成薄層,用毛細(xì)管、鋼筆或者其他工具將樣品點染于薄板一端,之后將點樣端浸入流動相中,依靠毛細(xì)作用令流動相溶劑沿薄板上行展開樣品。薄層色譜法成本低廉操作簡單,被用于對樣品的粗測、對有機合成反應(yīng)進(jìn)程的檢測等用途。
2. 柱色譜法
柱色譜法是最原始的色譜方法,這種方法將固定相注入下端塞有棉花或濾紙的玻璃管中,將被樣品飽和的固定相粉末攤鋪在玻璃管頂端,以流動相洗脫。常見的洗脫方式有兩種,一種是自上而下依靠溶劑本身的重力洗脫,一種是自下而上依靠毛細(xì)作用洗脫。收集分離后的純凈組分也有兩種不同的方法,一種方法是在柱尾直接接受流出的溶液,另一種方法是烘干固定相后用機械方法分開各個色帶,以合適的溶劑浸泡固定相提取組分分子。柱色譜法被廣泛應(yīng)用于混合物的分離,包括對有機合成產(chǎn)物、天然提取物以及生物大分子的分離。
3. 高效液相色譜
高效液相色譜 (HPLC) 目前應(yīng)用最多的色譜分析方法,高效液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn);進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密;由于液體流動相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。HPLC應(yīng)用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領(lǐng)域。
4. 氣相色譜
氣相色譜是機械化程度很高的色譜方法,氣相色譜系統(tǒng)由氣源、色譜柱和柱箱、檢測器和記錄器等部分組成。氣源負(fù)責(zé)提供色譜分析所需要的載氣,即流動相,載氣需要經(jīng)過純化和恒壓的處理。氣相色譜的色譜柱一般直徑很細(xì)長度很長,根據(jù)結(jié)構(gòu)可以分為填充柱和毛細(xì)管柱兩種,填充柱比較短粗,直徑在5毫米左右,長度在2-米之間,外殼材質(zhì)一般為不銹鋼,內(nèi)部填充固定相填料;毛細(xì)管柱由玻璃或石英制成,內(nèi)徑不超過0.5毫米,長度在數(shù)十米到一百米之間,柱內(nèi)或者填充填料或者圖布液相的固定相。柱箱是保護(hù)色譜柱和控制柱溫度的裝置,在氣相色譜中,柱溫常常會對分離效果產(chǎn)生很大影響,程序性溫度控制常常是達(dá)到分離效果所必須的,因此柱箱扮演了非常重要的角色。
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